Telitromisin (HMR 3647) ve pirimetamin'in toxoplasma GondII'ye etkinliklerinin hücre kültür tabanlı elisa yöntemi ile araştırılması / Mehmet Kılınç; Danışman Murat Hökelek.

Abstract

Toksoplazmoz, zorunlu hücre içi bir paraziti Toxoplasma gondii'nin etken olduğu, edinsel veya konjenitalklinik şekillerde ortaya çıkan bir infeksiyon hastalığıdır.İmmün yetmezliği veya immün sistemi baskılanmış hastalarda ölümcül olabilen değişik klinik tabloların gelişmesi toksoplazmozun önemini artırmıştır.Toksoplazmozun tedavisi için kullanılan ilaçların, her zaman etkili olmadığı veya kullanımının tehlikeli olabileceği hamile kadınlarda, konjenital infeksiyonlarda, immün sistemi baskılanmış ve göz infeksiyonu olan hastalarda, daha etkili ve daha az toksik ilaçlara ihtiyaç duyulmaktadır.Bu yüzden, hastaların tedavisi için yeni tedavi yaklaşımları ve tedavilerin araştırılmasına devam edilmektedir.Bu çalışmanın amacı, yeni bir makrolid türevi ilk ketolid olan telitromisin (HMR 3647)ile halen tedavi en etkili ilaç olarak kullanılan pirimetaminin, in vitro T. gondii RH suşu takizoitleri ile enfekte HeLa epitel hücrelerinde anti-Toxoplasma aktivitelerini araştırmaktı.Antimikrobiyal ajanların anti-Toxoplasma aktivitelerinin değerlendirilmesinde genellikle hücre kültürleri ve infekte fare modelleri kullanılmaktadır.Bu çalışmada, 96 kuyucuklu hücre kültür pleytlerinde hazırlanan monolayer Hela hücreleri, farelerden izole edilen T.gondii RH suşu takizoitleri ile infekte edildi.İlaçlar eklendikten sonra ELISA yöntemi ile inkübasyonun 24, 48 ve 72.saatlerinde etkinlikleri değerlendirildi.Ayrıca test edilen ilaçların ve takizoitlerin Hela hücrelerine toksisiteleri, Neutral Red Dye Uptake değerlendirme testi ile saptandı.Telitromisin, inkübasyonun 48.saatinde 0.5mg/ml (p‹0.01) ve daha yüksek konsantrasyonlarda, 72.saatinde test edilen en küçük konsantrasyon 0.05mg/ml (p‹0.05)da bile, pirimetamin ise 48 ve 72.saatte en düşük konsantrasyon 0.01mg/ml (p›0.05) hariç bütün konsantrasyonlarda, T.gondii takizoit replikasyonunu anlamlı olarak inhibe ettiği saprtandı.Telitromisin ve pirimetaminin inkübasyonun 72.saatinde, %50 inhibitör konsantrasyon (IC50)değerleri sırasıyla 0.81 mg/ml ve 0.16mg/ml olarak hesaplandı.Ayrıca her iki ilacın test edilen konsantrasyonlarının Hela hücrelerine toksik olmadığı saptandı.Sonuç olarak; pitimetamine benzer şekilde in vitro T.gondii RHsuşu takizoit replikasyonunu anlamlı olarak inhibe ettiği gösterilen telitromisin (HMR 3647), daha ileri çalışmalar ile in vivo hayvan modellerinde ve diğer ilaçlarla kombinasyon aktivitelerinin gösterilmesi halinde toksoplazmoz tedavisinde yararlı olabilir.