Virulan Mycobacterium tuberculosis (H37Rv) ile uyarılan insan makrofajlarından nitrik oksit salınımına antitüberküloz ajanların etkileri

Abstract

Bu çalışmada, izoniazid, rifampisin, streptomisin ve etambutolün Mycobacterium tuberculosis H37Rv ile uyarılan insan makrofajlarından nitrik oksit (NO) sentezine etkileri araştırılmıştır. Bu amaçla, insan makrofajları "Ficoll-Hypaque density gradient" metodu ile ayrılarak 105 hücre/ml konsantrasyonunda mikropleyt çukurlarına dağıtılmış ve bir gece 37\circC'de inkübe edilmiştir. Daha sonra çukurlara M.tuberculosis H37Rv (104 cfu/ml) süspansiyonundan eklenmiş ve bir saat 37\circC'de inkübasyondan sonra denenecek antibiyotik solüsyonları ile karşılaştırılmıştır. NO sentezi, kültür süpernatanlarındaki nitrit düzeylerinin 3, 6, 24 ve 48. saatlerde Griess ayıracı ile ölçülmesiyle değerlendirilmiştir. Tüm çalışmalarda, sadece makrofaj ve makrofaj M.tuberculosis içeren kontrol çukurları kullanılmıştır. Sonuç olarak, virulan M.tuberculosis (H37Rv) suşunun makrofajlardan nitrit salınımını artırdığı ve izoniazid içeren çukurdaki nitrit seviyesinin diğer ilaçlarla karşılaştırıldığında istatistiksel olarak önemli düzeyde yüksek olduğu gözlenmiştir (p0.05).

The present study was carried out to determine the effects of isoniazid, rifampicin, streptomycin and ethambutol on the nitric oxide (NO) synthesis by human macrophages induced by Mycobacterium tuberculosis H37Rv. Human macrophages were obtained by Ficoll-Hypaque density gradient method, dispersed into the microplate wells (105 macrophages/well) and incubated at 37\circC overnight. The next day, M.tuberculosis H37Rv suspensions (104 cfu/ml per well) were added into the wells and after incubation at 37\circC for one hour, the antibiotic solutions which will be studied were added. The NO synthesis has been evaluated by measuring the nitrite levels with Griess reagent at 3rd; 6th, 24th and 48th hours of the culture supernatants. In each trial, the control wells containing macrophages alone and macrophages M.tuberculosis, were included to the study. As a result, nitrite levels were found to be increased by virulent M.tuberculosis (H37Rv) and the nitrite level in the isoniazid well was detected significantly higher than the other antibiotic wells, statistically (p<0.05).